試薬ホーム > 製品情報 > 遺伝子 > ニッポンジーン社 耐熱性鎖置換型DNA Polymerase

NPGロゴ等温遺伝子増幅法などの鎖置換活性を利用したアプリケーションに
耐熱性鎖置換型DNA Polymerase

 Csa DNA Polymerase、96-7 DNA Polymeraseは、耐熱性及び鎖置換型 DNAポリメラーゼ活性を有し、鋳型となる二本鎖 DNAの水素結合を自ら解離しつつ、新しいDNA鎖を合成する酵素です。
 鎖置換型 DNAポリメラーゼは、その特性から二本鎖 DNAの解離を必要としないため一定温度での DNA合成が可能であり、またDNAの二次構造による合成阻害を受けません。

特長

・ 低価格
・ 高純度・高度な品質管理
・ 反応温度の異なる2種類の酵素をラインアップ
Csa DNA Polymeraseは60-70℃、96-7 DNA Polymeraseは50-55℃で活性が最大

製品仕様

Csa DNA Polymerase】

構成 Csa DNA Polymerase (8 units/μl) : 1,600 units
・ 10×Csa Reaction Buffer (80 mM Mg2+) : 500 μl
形状 10mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1% Tween 20, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol
unit定義 1 unit は、仔牛胸腺 DNA をプライマー / 鋳型として 65℃、30 分間に
10 nmoles の dNTP を酸不溶性沈殿物に取り込む活性。

【96-7 DNA Polymerase】

構成 ・ 96-7 DNA Polymerase (8 units/μl) : 1,600 units
・ 10× 96-7 Reaction Buffer (95 mM Mg2+) : 500 μl
形状 10mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1% Tween 20, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol
unit定義 1 unit は、仔牛胸腺 DNA をプライマー / 鋳型として 55℃、30 分間に
10 nmoles の dNTP を酸不溶性沈殿物に取り込む活性。

【注意事項】
・ 本製品は試験研究用です。
・ 本酵素及び本酵素生産方法は株式会社ニッポンジーンが特許出願中です。

使用例1 : RCA法による耐熱性と至適反応温度の評価

【RCA法 反応条件】

・ 反応液組成

M13mp18 single strand DNA 20 ng
Universal primer 50 nM
dNTPs Mixture 0.25 mM each
Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃) 20 mM
KCl 10 mM
(NH4)2SO4 10 mM
MgSO4 2 mM
Tween 20 0.1%
DNA Polymerase 8units
合計 20 μl

・ 各温度にて30分間反応

【結果】

・レーン
M : Gene Ladder Wide 1 (コードNo. 313-06961)
D : 鋳型DNA (M13mp18) single strand DNA

・備考
0.7% アガロースS/TAEゲル電気泳動、エチジウムブロマイド染色

・プライマー配列
Universal Primer : 5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'

使用例2 : LAMP法への利用 注1

【反応液組成 : Csa DNA Polymerase】

Candidatus Liberibacter asiaticus DNA 1×106 copies
FIP 40 pmol
BIP 40 pmol
F3 Primer 5 pmol
B3 Primer 5 pmol
Loop Primer F 20 pmol
Loop Primer B 20 pmol
dNTPs Mixture 1.4 mM each
10× Csa Reaction Buffer
Csa DNA Polymerase 8 units
合計 25 μl

・ 65℃、60分間反応

【反応液組成 : 96-7 DNA Polymerase】

Candidatus Liberibacter asiaticus DNA 1×106 copies
FIP 40 pmol
BIP 40 pmol
F3 Primer 5 pmol
B3 Primer 5 pmol
Loop Primer F 20 pmol
Loop Primer B 20 pmol
dNTPs Mixture 2.0 mM each
10× Csa Reaction Buffer
96-7 DNA Polymerase 8 units
合計 25 μl

・ 60℃、60分間反応

【結果】

・レーン
M : Gene Ladder Wide 1 (コードNo. 313-06961)
1 : Geobacillus 属菌由来鎖置換型 DNA Polymerase
2 : Csa DNA Polymerase
3 : 96-7 DNA Polymerase

・備考
3.0% アガロース21/TAEゲル電気泳動、エチジウムブロマイド染色

・プライマー配列
FIP : 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'
BIP : 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'
F3 Primer : 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'
B3 Primer : 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'
Loop Primer : 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'
Loop Primer B : 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'


















注1 : LAMP (Loop-mediated Isothermal Amplification) 法は栄研化学株式会社が特許を保有しています。
注2 : Candidatus Liberibacter asiaticus を検出するための LAMP プライマーセットは、先端技術を活用した農林水産研究高度化事業「難防除病害カンキツグリーニング病の拡大阻止技術の開発」において、独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構九州沖縄農業研究センターによって開発されました。

価格表

コードNo. 品 名 容 量 希望納入価格(円)
319-07281 Csa DNA Polymerase 1,600 units 9,000
319-07301 96-7 DNA Polymerase 1,600 units 9,000

*表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
*表示している希望納入価格は2012年12月の価格です。最新価格は「製品検索」からコードNo.で検索してご確認ください。

関連製品

コードNo. 品 名 容 量 希望納入価格(円)
312-07271 dNTPs Mixture (25 mM each) 400 μl 10,000

*表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
*表示している希望納入価格は2012年12月の価格です。最新価格は「製品検索」からコードNo.で検索してご確認ください。

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表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
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