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NPGロゴホットスタートPCR用 DNA Polymerase
Hot-Start Gene Taq

 本品は、ホットスタートPCR用の耐熱性DNAポリメラーゼです。PCRサイクルに入る前に95℃、5分間の熱処理によって酵素の活性化処理を行います。
 PCR初期に過剰な酵素活性を抑えたホットスタートPCRを行うことができるため、ミスプライミングや無為な酵素の失活を抑えることができます。用途によって使い分けができる2種類の10倍濃度の反応バッファーが添付されます。

特長

1) 高い特異性と高いDNA収量
2) ホットスタート機能を持ち、室温での反応液調製が可能
3) マルチプレックスPCRに最適
4) 宿主由来DNA混入を極力少なくした高い精製度

製品構成

Hot Start Gene Taq 250 units 50 units
dNTP Mixture
(2.5 mmol/l each)
800 μl×1本 160 μl×1本
10×Gene Taq Universal Buffer
(15 mmol/l Mg2+)
1 ml×1本 1 ml×1本
10×Brilliant Buffer
(20 mmol/l Mg2+)
1 ml×1本 200 μl×1本

製品情報

M.W. 68 kDa
活性 2.5 units/μl
単位の定義 1 unitは、activated calf thymus DNAをプライマー/鋳型として74℃、30分間に
10 nmolのデオキシヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む酵素活性とする。
形状 20 mmol/l Tris-HCl (pH8.0)、100 mmol/l KCl、0.1 mmol/l EDTA、
0.5 % Tween 20、1 mmol/l DTT、50% Glycerol
純度 本酵素 10 unitsと1 μgのλ/HindV digestとを74℃、1時間反応させても
アガロースゲル電気泳動のパターンに影響は認められない。

実験例

HeLa DNA (50 ng)を鋳型として、下記3種類の増幅困難なプライマーに対してシャトルPCRを行った。

【プライマー】
・A-1
F:5'-AGTGGGCAGAGCCAGTCACT-3'
R:5'-AGACTGGATGCCCAGCCTAA-3'
・A-2
F:5'-CAGACTCTGGGGCTGCCCAT-3'
R:5'-TCAAACACTGGCTTGGGGTA-3'
・A-3
F:5'-CCTTGGAGCAATGAGCAATG-3'
R:5'-CATCTTTCCAGGCTCCTTCC-3'

【実験方法】

鋳型DNA 50 ng
プライマー (10 μM each) 1 μl
10×Reaction Buffer 5 μl
Polymerase 5 μl
dNTP Mixture 0.2 mM
Polymerase 0.25 U
Total 50 μl
PCR条件 95℃, 5 min

(95℃, 30 sce→68℃, 1.5 min)×30 cycles

68℃, 3 min

4℃

【結果】
Hot-Start Gene TaqでBrilliant Bufferを使用すると、特異性の低いプライマーからでも特異性の高い増幅ができ、目的の増幅産物が高収量得られた。

Agarose 21

価格表

コードNo. 品 名 容 量 希望納入価格(円)
313-07044 Hot-Start Gene Taq 50 units 6,600
319-07041 250 units 26,500
315-07043 250 units×4 93,000

*表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
*表示している希望納入価格は2012年12月の価格です。最新価格は「製品検索」からコードNo.で検索してご確認ください。

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