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遺伝子・タンパク質関連機器

タンパク質解析の2次元電気泳動を自動化

シャープライフサイエンス社製

Auto2D   2次元電気泳動装置
BM-100

Auto2D Plus   2次元電気泳動装置
BM-100+BM-100AP

  • 自動で簡単操作
  • 再現性が高い
  • 高速分離※1
  • 前処理が簡単(Auto2D Plus)
  • 自動中間染色(Auto2D Plus)※2

※1 従来装置(手動)との比較
※2 脱塩工程が使えなくなります。
       ラベル試薬に適した検出器が必要になります。

製品コード
309-99051

概 要

熟練した技術が必要なタンパク質の2次元電気泳動をシャープの最先端の技術により自動化、高精度な分離を約100分※3の非常に短時間で行います。さらに、「Auto2D」は、分析チップをセットしタッチパネルの簡単操作だけで、2次元電気泳動ができます。

※3 Auto2Dの場合。なお作業時間は設定により変わることがあります。

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特 長

  • 高速分離 約100分※3(従来は2日間)
  • 高分解能 等電点分解能 pH0.02 分子量分解能 2kDa
  • 高再現性 各蛋白質スポットの位置、スポット蛍光強度の再現性が向上
  • 簡単操作 タッチパネルで画面を見ながら簡単操作
2次元電気泳動によるタンパク質解析の流れ

マウス肝臓可溶性タンパク質を5回分析した結果

タッチパネルの操作画面

タンパク質分析チップへの試薬の投入から、各種設定・スタートまでモニタ画面の手順を確認しながら行えるので間違いが防げます。

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分析事例
高解像度を要求されるタンパク質リン酸化の検出例

■ ヒトビメンチンタンパク質のリン酸化パターンの検出

  • Auto2Dを用いてヒト悪性脳腫瘍タンパク質を2次元電気泳動した後、抗ビメンチン抗体を用いて検出した結果
  • IEFチップ:pH4-7
  • PAGEチップ:10% アクリルアミドゲル

ヒト悪性脳腫瘍由来ビメンチンタンパク質のN末端切断シフトおよびリン酸化シフトを同時に検出できた

リン酸化プロテオーム解析例

■ リン酸化プロテオーム解析によるmTORシグナル伝達因子の検出

  • mTOR阻害剤であるラパマイシン、もしくは作用機序の異なるmTOR阻害剤Aの添加、非添加の培養細胞を使用し、Auto2Dを用いてリン酸化プロテオーム解析を行った結果
  • IEFチップ:pH4-7
  • PAGEチップ:10% アクリルアミドゲル

ラパマイシン処理でリン酸化が変化するタンパク質を数多く検出できた

タンパク質の差異解析・タンパク質アイソホーム分析例 2

■ ヒト正常細胞と不死化(癌化)細胞のタンパク質の比較解析

  • Auto2Dを用いて蛍光試薬Aで標識したヒト正常繊維芽細胞と蛍光試薬Bで標識した不死化(癌下)細胞のタンパク質を2次元電気泳動した結果(赤:試薬Aの蛍光画像、緑:試薬Bの蛍光画像)
  • IEFチップ:pH4-7
  • PAGEチップ:10% アクリルアミドゲル

不死化(癌化)に伴い変化するスポット群を検出できた

■ 実験動物の脳の14-3-3タンパク質のアイソフォームの解析

  • Auto2Dを用いてマウス海馬細胞質タンパク質をpH4-5.5のカスタムIEFチップで2次元電気泳動した結果
  • IEFチップ:pH4-5.5
  • PAGEチップ:10% アクリルアミドゲル

14-3-3 タンパク質のアイソフォームを含むスポット群を検出できた

2次元電気泳動ーウェスタンブロッティング解析例

■ 抗体ミックスを用いたTPA処理マウス正常形質細胞の抽出タンパク質の変動検出

  • DMSOもしくは200 nMのTPA(12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate)で処理した40μgの細胞由来タンパク質を、Auto2Dを用いて2次元展開、PVDF膜転写した後、下記6種類の抗体を混合した抗体ミックスを用いて2D-ウェスタンブロッティングを行った結果
  • IEFチップ:pH3-10
  • PAGEチップ:10% アクリルアミドゲル

下記6種類の標的タンパクの抗体を用いた結果、各タンパク質のリン酸化を同時に検出できた

Auto 2D plus
ソフトアップグレードにより性能アップ

Auto 2D plusを使用した電気泳動結果

電気泳動事例

自動中間染色※9

構成

その他ラインナップ

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主な仕様

■本体
外形寸法(mm) W240 × D428 × H445( 使用時:H536)
質量 約17Kg
電源 AC100V、50/60Hz、定格容量:160VA( 最大)
使用環境温度・湿度 5 ~ 35℃ 35 ~ 85% RH
■チップ
IEF チップ
(1次元目)
外形寸法(mm) W60 × D1.2 × H23
保存温度 -20℃ (冷凍)
PAGE チップ
(2次元目)
外形寸法(mm) W70 × D70 × H12
保存温度 4℃ (冷蔵)
Auto 2D plus
コードNo. メーカーコード 品 名 容量    希望納入価格(円)
309-99051 BM-100 Auto2D 2次元電気泳動装置 1台 5,000,000円
307-99111 BM-1E Auto2D 電極チップ 1個 150,000円
304-99121 BM-1S Auto2D 溶液チップ 10個 10,000円
303-99071 BM-114070 Auto2D 1次元目IEF チップpH 勾配 4-7 10個 20,000円
306-99061 BM-113010 Auto2D 1次元目IEF チップpH 勾配 3-10 10個 20,000円
384-02211 BM-114055 Auto2D 1 次元目 IEF チップ pH 勾配 4-5.5 10個 24,000円
381-02221 BM-115065 Auto2D 1 次元目 IEF チップ pH 勾配 5-6.5 10個 24,000円
387-04761 BM-116010 Auto2D 1 次元目 IEF チップ pH 勾配 6-10 10個 24,000円
384-04771 BM-117010 Auto2D 1 次元目 IEF チップ pH 勾配 7-10 10個 24,000円
389-08001 BM-12065 Auto2D 2 次元目 PAGE チップ 6.5% 10個 30,000円
300-99081 BM-12075 Auto2D 2次元目PAGE チップ 7.5% 10個 30,000円
307-99091 BM-12100 Auto2D 2次元目PAGE チップ 10.0% 10個 30,000円
300-99101 BM-12125 Auto2D 2次元目PAGE チップ 12.5% 10個 30,000円
381-04781 BM-1RYSJ1 Auto2D 用 Glycine 系試薬セット 1セット 28,000円
388-04791 BM-1RYTJ1 Auto2D 用 Tricine 系試薬セット 1セット 30,000円
005-02990 BM-100AP BM-100 アップグレードソフト 1個 750,000円
386-13641 BM-1EP Auto2D Plus用 電極チップPlus 1個 160,000円
383-13651 BM-1SP Auto2D Plus用 溶液チップPlus 10個 10,000円

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