和光純薬工業株式会社試薬 [Laboratory Chemicals] 試験研究用試薬・抗体の製造販売および各種受託サービス
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イメージ IL-12は、分子量35,000(p35)と40,000(p40)の二つのサブユニットからなるヘテロ二量体のサイトカインで、ナチュラルキラー細胞刺激因子(NKSF)や細胞傷害性リンパ球成熟因子(CLMF)として知られています。
IL-12の各サブユニットは単独では活性を示さず、p35とp40がジスルフィド結合で結ばれたIL-12p70が主として機能します。IL-12は主にマクロファージおよびB細胞から産生され、IFN-γの産生を誘導し、細胞性免疫に関与する1型ヘルパーT細胞(Th1)の分化を誘導することにより、自己免疫疾患、微生物やウィルスの感染、がんなどに対する免疫反応の開始において重要な役割を担っています。


リンク関係


特長

  • 短時間(全反応時間:4時間50分)で測定可能
  • 環境に優しい防腐剤を使用
  • 高い測定精度と再現性
  • 有効期限は製造日より12ヶ月
  • 標準品は大腸菌リコンビナントで、カルタヘナ法非該当

製品情報

イメージ ■検体
マウス血清
マウス血漿(EDTA)

■標準曲線範囲
2.87〜700 pg/mL

■キットの構成
(A)抗体固相化96ウェルプレート・・・96ウエル(8×12)/1枚
(B)マウスIL-12標準品・・・・・・・・・・・・ 1μg/1本
(C)緩衝液・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 60mL /1本
(D)ビオチン結合抗IL-12抗体・・・・・・・・・・・・ 1本
(E)ペルオキシダーゼ・アビジン結合物・・・・・ 100μL /1本
(F)発色液(TMB)・・・・・・・・・・・・・・・ 12mL /1本
(H)反応停止液(1M H2SO4) ・・・・・・・・・ 12mL /1本
(I)濃縮洗浄液(10×)・・・・・・・・・・・・ 100mL /1本


精度試験(アッセイ内変動)

n / ID Sample1
(pg/mL)
Sample2
(pg/mL)
1 99.0 237
2 94.0 218
3 91.8 214
4 95.8 221
5 96.0 229
mean 95.3 224
SD 2.7 9.0
CV(%) 2.8 4.0

炎症モデルマウス血清2検を5重測定し精度を確認した。

再現性試験(アッセイ間変動)

Day /ID Sample1
(pg/mL)
Sample2
(pg/mL)
Sample3
(pg/mL)
0日目 54.4 164 242
1日目 61.4 173 257
2日目 55.6 169 258
3日目 63.4 178 254
mean 58.7 171 253
SD 4.4 5.6 7.2
CV(%) 7.5 3.3 2.9

炎症モデルマウス血清3検体を4日間3重測定し精度を確認した。

添加回収試験

血清検体

添加量
(pg/mL)
実測値
(pg/mL)
回収量
(pg/mL)
回収率
(%)
0 38.2 - -
50.0 82.7 44.5 89.0
150 82.7 44.5 89.0
350 404 366 105

血漿検体

添加量
(pg/mL)
実測値
(pg/mL)
回収量
(pg/mL)
回収率
(%)
0 41.6 - -
50.0 88.4 46.8 93.6
150 202 160 107
350 417 375 107


3濃度の標準品を血清検体および血漿検体に添加し添加回収試験を行い回収率を確認した。

希釈直線性試験(血清/血漿)

IL-12を添加した血清検体および血漿検体をキット緩衝液を用いて倍々希釈して測定し、直線性を確認した。

標準曲線(例)

プレートリーダーはInfinite f200(Tecan)を使用
演算処理は3次多項式を使用


操作法

抗体固相化96ウェルプレート  
 ↓  
洗浄4回  
 ↓  
希釈検体又は標準溶液 100µL
 ↓  
攪拌、室温、2時間静置反応  
 ↓  
洗浄4回  
 ↓  
ビオチン結合抗IL-12抗体 100µL
 ↓  
攪拌、室温、2時間静置反応  
 ↓  
洗浄4回  
 ↓  
ペルオキシダーゼ・アビジン結合物 100µL
 ↓  
攪拌、室温、30分間静置反応  
 ↓  
洗浄4回  
 ↓  
発色液(TMB) 100µL
 ↓  
攪拌、室温、20分間静置反応  
 ↓  
反応停止液(1M H2SO4 100µL
 ↓  
攪拌  
 ↓  
吸光度測定(主波長450nm、副波長620nm)  

室温:20〜25℃

検体測定(例)

正常マウス血清

検体 測定値(pg/mL)
N-1 10.6
N-2 11.0
N-3 9.9
N-4 9.2
N-5 8.8

C57BL/6J,8週齢,♂,心臓採血,2重測定
正常マウス血清中のIL-12を定量検出できた。

炎症モデルマウス血清/血漿

検体 測定値(pg/mL)
Serum-3 182
Serum-4 278
Serum-5 223
Plasma-4 183
Plasma-5 155

MRL-lpr,12週齢,♂,心臓採血,2重測定
抗凝固剤;EDTA-2Na(最終濃度1.0mg/mL)


価格表

コードNo. メーカーコード 品 名 標準曲線範囲 容 量 希望納入価格(円)
638-40841 AKMIL12-011 レビス® Mouse IL-12 ELISA Kit 2.87〜700 pg/mL 96回用 58,000
631-40831 AKH-VEGF レビス® Human VEGF ELISA Kit 1.10〜800 pg/mL 96回用 58,000

*本キットは体外診断用ではありません。
*希望納入価格には消費税等が含まれておりません。

関連製品

コードNo. 品 名 規格 容 量 希望納入価格(円)
096-05361 Interleukin-12 (IL-12 p70), Human, recombinant 細胞生物学用 10µg 39,000
095-05331 Interleukin-12 (IL-12), Mouse, recombinant 10µg 39,000
095-05191 Interleukin-12 p40 (IL-12 p40), Human, recombinant 10µg 39,000

*希望納入価格には消費税等が含まれておりません。

 

掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。最新価格は「製品検索」からコードNo.で検索してご確認ください。

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