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MagCapture™ RNA Pull Down Assay Kit

本キットは新規アビジン様タンパク質Tamavidin®2のアミノ酸改変体の一つでビオチン溶出が可能な性質を持つTamavidin®2-REVを固相化した磁気ビーズと弊社独自の溶出用バッファーを組み込んだキットです。

ビオチン化RNA(bait RNA)を利用したRNA Pull Down法に用いる事ができ、ビオチン化RNAを含むリボヌクレオプロテイン(RNP)複合体を変性させることなく、ビオチン競合溶出によって回収することができます。
そのため、SDSなどを用いた変性溶出法に比べ回収物への非特異的タンパク質の混入を抑える利点があり、目的のRNAと相互作用するタンパク質の同定や機能未知な新規lncRNAの機能解析を行うアプリケーションに有用です。


リンク関係


Tamavidin®2-REV

<Tamavidin®2-REV 〜ビオチンとの可逆的結合性能〜>
Takakura, Y. et al.: "Tamavidin® 2-REV : an engineered tamavidin with reversible biotin-binding capability.", J. Biotechnol., 164(1), 19-25(2013).

Tamavidin®2-REVは、新規アビジン様タンパク質「Tamavidin®2」の改変体です。ビオチンとの結合力を低減することにより、可逆的なビオチン結合複合体を形成することができます。これにより、過剰ビオチンの添加により、ビオチン化分子の競合溶出が可能です。
(従来のアビジン/ストレプトアビジンとビオチンとの結合力は非常に強固で、不可逆的に結合します)

キット内容

キット 【キット内容】 10回用

 ○ RPD Capture Magnetic Beads・・500μL
 ○ RPD Wash Buffer・・・・・・・・55mL
 ○ RPD Cell Lysis Buffer・・・・・・25mL
 ○ RPD Reconstitution Buffer ・・・1,500μL
 ○ RPD Biotin Elution Buffer・・・・1,000μL

操作手順 概要

操作手順

データ 〜HOTAIR RNA を用いたRNA Pull Down Assay〜

データ データ

銀染色
 ベイトRNA : ビオチン標識HOTAIR RNAセンス鎖
 溶出 : Sample Buffer、4%SDS溶液、キット添付ビオチン溶液
 サンプル: K562細胞(1×107細胞)のトータルセルライセート


Western Blot
 一次抗体:抗Ezh2抗体
 二次抗体:抗ウサギIgG(Fc), モノクローナル抗体, POD結合(code No. 016-23943


従来品と比較して本キットでは低バックグラウンドでRNA結合タンパク質を回収。


コードNo. 品 名 規 格 容 量 希望納入価格(円)
297-77501 freeze MagCapture™ RNA Pull Down Assay Kit 遺伝子研究用 10回用 58,000

*製品コードをクリックするとSiyaku.comにリンクしますので、現在の価格、在庫はそちらからご確認下さい。

MagCapture™ Tamavidin®2-REV
MagCapture™ HP Tamavidin®2-REV 

本品はTamavidin®2-REVの磁気ビーズ結合品です。粒子径の異なる2種類をご用意しています。

※ MagCapture™ HP Tamavidin®2-REV は低粒子径タイプです。

データ 〜HOTAIR RNA を用いたRNA Pull Down Assay/MagCapture™ Tamavidin®2-REV

データ データ

Streptavidinとの性能比較
銀染色
 ベイトRNA : ビオチン標識HOTAIR RNAセンス鎖
 溶出 : Sample Buffer
 サンプル: K562細胞(5×106細胞)のトータルセルライセート


Western Blot
 一次抗体:抗Ezh2抗体
 二次抗体:抗ウサギIgG(Fc), モノクローナル抗体, POD結合(code No. 016-23943


従来品と比較して本キットでは低バックグラウンドでRNA結合タンパク質を回収。

データ 〜HOTAIR RNA を用いたRNA Pull Down Assay〜

データ データ

MagCapture™ Tamavidin®2-REVとの回収量比較
銀染色
 ベイトRNA : ビオチン標識HOTAIR RNAセンス鎖
 溶出 : Sample Buffer
 サンプル: K562細胞(5×106細胞)のトータルセルライセート


Western Blot
 一次抗体:抗Ezh2抗体
 二次抗体:抗ウサギIgG(Fc), モノクローナル抗体, POD結合(code No. 016-23943


MagCapture™ HP Tamavidin®2-REV を用いることでRNA結合タンパク質の回収量(SDS sample buffer溶出)が向上した。

コードNo. 品 名 規 格 容 量 希望納入価格(円)
136-18341 freeze MagCapture™ Tamavidin®2-REV 遺伝子研究用 2mL 40,000
133-18611 freeze MagCapture™ HP Tamavidin®2-REV 遺伝子研究用 2mL 58,000

*製品コードをクリックするとSiyaku.comにリンクしますので、現在の価格、在庫はそちらからご確認下さい。

Tamavidin®2 組換え体シリーズ

キノコの一種であるタモギダケ(Pleurotus cornucopiae)からクローニングされたアビジン様ビオチン結合タンパク質Tamavidin®2のアミノ酸改変型のラインアップです。
従来のTamavidin®2の特長に加え、各製品それぞれに異なった特長がありますので、用途に応じて使い分けができます。

品 名 等電点(pl)※1 耐熱性※2 有機溶媒耐性 ビオチン結合速度定数
(ka(M-1S-1))
ビオチン解離速度定数
(kd(S-1))
分子量(4量体)
Tamavidin®2 7.4 Tm=85℃ あり (1.0±0.5)×106 検出限界値以下※4 約60kDa
Tamavidin®2-REV 8 Tm=75℃ - (1.3±0.5)×106 (1.5±0.4)×10-5 約60kDa
Tamavidin®2-LPI 6 Tm=65℃ - (1.2±0.1)×106 検出限界値以下 約60kDa
Tamavidin®2-HOT 7.23 高耐熱性 高耐性※3 (3.0±1.7)×105 検出限界値以下 約60kDa

※1 等電点:Tamavidin®2-LPIのみ実測値。他はアミノ酸配列より算出した値。
※2 耐熱性(Tm値):ビオチン結合活性が加熱前の50%となる20分加熱温度。Tamavidin®2-HOTについては、99.9℃、30分間加熱後も結合活性90%以上を保持するのでTm値の算出不可。
※3 高耐性:40-50% DMSO中。
※4 検出限界値:5×10-6(kd(S-1))


コードNo. 品 名 特 長 規 格 容 量 希望納入価格(円)
209-18261 freeze Tamavidin®2, recombinant 免疫化学用 1mg 8,500
205-18263 5mg 25,000
203-18264 25mg 120,000
203-19401 freeze Tamavidin®2-REV, recombinant ビオチンと可逆的結合性 1mg 18,000
209-19403 5mg 70,000
202-19351 freeze Tamavidin®2-LPI, recombinant 非特異的結合低減性 1mg 12,000
208-19353 5mg 48,000
209-19361 freeze Tamavidin®2-HOT, recombinant 超耐熱・有機溶媒耐性 1mg 18,000
205-19363 5mg 70,000

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ライセンスについて
 Tamavidin®は日本たばこ産業株式会社の登録商標です。
 Tamavidin®2は日本たばこ産業株式会社からライセンスを受けて販売しております。

refrigerator・・・2〜10℃保存   freeze・・・-20℃保存   -80 degree C・・・-80℃保存   表示がない場合は室温保存です。
特定毒物・・・特定毒物   毒物1 毒物2・・・毒物   劇物1 劇物2 劇物3・・・劇物   毒薬・・・毒薬   劇薬・・・劇薬   危険物・・・危険物   向精神薬・・・向精神薬
特定麻薬向精神薬原料・・・特定麻薬向精神薬原料   化審法 第一種特定化学物質・・・化審法 第一種特定化学物質   化審法 第二種特定化学物質・・・化審法 第二種特定化学物質
化学兵器禁止法 第一種指定物質・・・化学兵器禁止法 第一種指定物質   化学兵器禁止法 第二種指定物質・・・化学兵器禁止法 第二種指定物質
カルタヘナ・・・カルタヘナ   覚せい剤取締法・・・覚せい剤取締法   国民保護法・・・国民保護法

*上記以外の法律および最新情報は、siyaku.com(http://www.siyaku.com/)をご参照下さい。

掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。最新価格は「製品検索」からコードNo.で検索してご確認ください。

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●北海道営業所 011-271-0285(代)
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