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組換えタンパク質生産は動物細胞の時代に!
日本発  次世代型アフィニティータグシステム

TARGET tag

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TARGET tagシステムは、ペプチドタグに対するモノクローナル抗体を使用した日本発のアフィニティー精製タグシステムです。TARGET tagシステムの応用により、動物細胞内で発現が困難な組換えタンパク質を迅速に発現・精製することに成功した論文が報告されています。

動物細胞発現系では、回収できる組換えタンパク質が微量なため、精製効率の良いアフィニティー精製タグが求められます。しかし、従来の市販システムではコストと時間がかかるため、この点を改善しました。


リンク関係


TARGET tag システム

TARGET tag システム

TARGET tag 発現ベクター 例

発現ベクター例

製品セレクション
ベクター 発現様式 宿主 MCSプロモーター
pEBMulti エピソーマル型安定発現 ヒト、サル、イヌなどの霊長類系動物細胞 CAG
pCAG 一過性発現 上記に加え、マウス、ラットなどの動物細胞 CAG

上記以外の抗生物質耐性遺伝子を搭載しているベクターもラインアップしています(TARGET tag パンフレット p.4 ご参照ください)。
シークエンス用プライマー配列、その他ベクター配列に関する詳細情報は、製品添付の現品説明書に記載されています。
また、弊社HPで配列情報(TARGET tag製品一覧で品名をクリック)、Multiple Cloning Site(リンク関係)情報が閲覧いただけます。

Anti TARGET tag Monoclonal Antibody (P20.1)

〔Concentration〕
 Indicated on the label.
 (Approx. 1.0mg/ml)

〔Formulation〕
 1×PBS (pH 7.5) aqueous solution .

〔Clone No.〕
 P20.1

〔Subclass〕
 IgG1

〔Working Dilution〕
 Western Blot 0.1-1 μg/ml
 Immunoprecipitation 10-50 μg/assay

Please optimize the most appropriate concentration for your analysis conditions and samples.

〔Storage〕
 Keep at -20℃.
 Avoid repeated freeze and thaw.

TARGET tag 使用例

Episomal ベクターによるTARGET tag C末端融合組換えタンパク質の発現


使用例

従来市販品のタグシステムと同様の発現量と検出感度を確認した。




TARGET tag  融合タンパク質の免疫沈降

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培養上清(培養7日目)10mLあたりに、0.1 mL(net 0.05mL)の抗体ビーズ(@Anti TARGET tag抗体ビーズ、AAnti DYKDDDDKタグ抗体ビーズ)をそれぞれ添加し、4℃, 2hr免疫沈降を行った。
洗浄操作後、回収した各ビーズに0.2 mg/mL TARGET tag peptide/TBS、および0.2 mg/mL DYKDDDDK peptide/TBSを0.5mL添加し、4℃, 0.5hr穏やか振とうした。遠心分離後、上清を回収した。更に、各ビーズに0.1M Glycine-HCl (pH2.7)を0.5mL添加し、室温で5min穏やか振とうした。遠心分離後、上清を回収し1M Tris-HCl (pH9.0)で中和処理した。上記は、SDS-PAGE後の銀染色結果。
従来のDYKDDDDKタグより低バックグラウンド

Transient ベクターによる TARGET tag 融合組換えタンパク質の発現

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M:M.W. Marker
1:ベクターのみをトランスフェクションした細胞培養上清
2:Protein Y-TARGET tag 発現プラスミドをトランスフェクションした細胞培養上清
3:TARGET tag-Protein Y 発現プラスミドをトランスフェクションした細胞培養上清
市販のTransientベクターでも使用可能

TARGET tag 製品一覧

TARGET tag 組換えタンパク質発現ベクター

動物細胞においてTARGET tag 融合タンパク質を発現させるベクターです。
下記製品セレクションをご参照のうえ、目的にあった遺伝子発現ベクターを選択してください。


製品セレクション
ベクター 発現様式 宿主 MCSプロモーター
pEBMulti エピソーマル型安定発現 ヒト、サル、イヌなどの霊長類系動物細胞 CAG
pCAG 一過性発現 上記に加え、マウス、ラットなどの動物細胞 CAG

コードNo. 品 名 選抜マーカー 容 量 希望納入価格(円)
大腸菌 動物細胞
165-26381 freezepCAG-Ble TARGET tag-C Bleomycin 20μg 65,000
162-26391 freezepCAG-Ble TARGET tag-N Bleomycin 20μg 65,000
165-26401 freezepCAG-Bsd TARGET tag-C Blasticidin S 20μg 65,000
162-26411 freezepCAG-Bsd TARGET tag-N Blasticidin S 20μg 65,000
169-26421 freezepCAG-Hyg TARGET tag-C Hygromycin B 20μg 65,000
166-26431 freezepCAG-Hyg TARGET tag-N Hygromycin B 20μg 65,000
163-26441 freezepCAG-Neo TARGET tag-C Kanamycin G418 20μg 65,000
160-26451 freezepCAG-Neo TARGET tag-N Kanamycin G418 20μg 65,000
167-26461 freezepEBMulti-Ble TARGET tag-C Bleomycin 20μg 65,000
164-26471 freezepEBMulti-Ble TARGET tag-N Bleomycin 20μg 65,000
161-26481 freezepEBMulti-Bsd TARGET tag-C Blasticidin S 20μg 65,000
168-26491 freezepEBMulti-Bsd TARGET tag-N Blasticidin S 20μg 65,000
161-26501 freezepEBMulti-Hyg TARGET tag-C Hygromycin B 20μg 65,000
168-26511 freezepEBMulti-Hyg TARGET tag-N Hygromycin B 20μg 65,000
165-26521 freezepEBMulti-Neo TARGET tag-C Kanamycin G418 20μg 65,000
162-26531 freezepEBMulti-Neo TARGET tag-N Kanamycin G418 20μg 65,000
169-26541 freezepEBMulti-Puro TARGET tag-C Ampicillin Puromycin 20μg 65,000
166-26551 freezepEBMulti-Puro TARGET tag-N Ampicillin Puromycin 20μg 65,000

ライセンスについて ・・・本製品をご購入後には研究用途でご使用下さい。本製品の転売、本製品に由来するDNA断片またはDNA配列情報を用いて新たに構築されたプラスミドの販売等、本製品をもちいた組換えタンパク質や細胞株の製造販売を目的としてご使用される場合には、弊社お客様相談室(labchem-tec@wako-chem.co.jp)までお問合せ下さい。



TARGET tag 組換えタンパク質 検出・精製用試薬

コードNo. 品 名 容 量 希望納入価格(円)
016-25481 freezeAnti TARGET tag, Monoclonal Antibody (P20.1) 200μg 30,000
012-25483 1mg 98,000
015-25571 freezeAnti TARGET tag, Monoclonal Antibody (P20.1)
Peroxidase conjugated
200μl 45,000
011-25573 1ml 150,000
018-25561 refrigeratorAnti TARGET tag Antibody beads 2ml(Net 1ml) 65,000
014-25563 10ml(Net 5ml) 250,000
012-25564 50ml(Net 25ml) 照会
200-19673 freezeTARGET tag peptide 5mg 20,000
208-19674 25mg 80,000
208-19831 freezeTARGET tag Washing Solution 50ml 12,000



refrigerator・・・2〜10℃保存   freeze・・・-20℃保存   -80 degree C・・・-80℃保存   表示がない場合は室温保存です。
tokuteidoku・・・特定毒物   doku1 doku2・・・毒物   geki1 geki2 geki3・・・劇物   kashin1・・・化審法 第一種特定化学物質   kashin2・・・化審法 第二種特定化学物質
dokuyaku・・・毒薬   gekiyaku・・・劇薬   kahei1・・・化学兵器禁止法 第一種指定物質   kahei2・・・化学兵器禁止法 第二種指定物質
kouseishinnyaku・・・向精神薬   tokumagenn・・・特定麻薬向精神薬原料   cartagena・・・カルタヘナ

*掲載内容は、本記事掲載時点の情報です。上記以外の法律および最新情報は、siyaku.com(http://www.siyaku.com/)をご参照下さい。

掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。製品コードをクリックするとSiyaku.comにリンクしますので、現在の価格、在庫はそちらからご確認下さい。

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