和光純薬工業株式会社試薬 [Laboratory Chemicals]
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りん酸基アフィニティークロマトグラフィー用試薬
Phos-tag® Agarose

Phos-tag®Agaroseをカラムに充填し、混合物からりん酸化タンパク質を分離、精製、濃縮します。界面活性剤、還元剤を使用しない為、生体内に近い状態のりん酸化タンパク質が得られます。

 

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特長

  • 1時間以内にりん酸化タンパク質が精製可能
  • 全ての実験操作を生理条件下(pH7.5)で実施可能
  • 還元剤や界面活性剤は不要
  • 実験操作は通常のアフィニティークロマトグラフィーとほぼ同様

 

りん酸アフィニティークロマトグラフィー法の原理

 

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使用例:A431ライセート中りん酸化タンパク質の精製

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M:分子量マーカー
Lane1:未吸着画分
Lane2:吸着画分
Lane3:カラム洗浄画分
Phos-tag®Agaroseをカラムに充填し、その上にA431のライセートをアプライ。
それぞれをSYPRO Ruby染色 (左図)とAnti-pTyr抗体を用いたウエスタンブロット (右図)にて検出した。
その結果、カラム吸着画分にりん酸化タンパク質が濃縮されていることが確認できた。

 

 

価格表/資料

コードNo. メーカーコード 品名 容量 希望納入価格(円)
302-93561 AG-501 Phos-tag® Agarose 0.5 ml 20,000
308-93563 AG-503 3 ml 98,000

*本キットは体外診断用ではありません。
*希望納入価格には消費税等が含まれておりません。

参考文献

  1. "Novel immobilized zinc(II) affinity chromatography for phosphopeptides and phosphorylated proteins",
    E. Kinoshita, A. Yamada, H. Takeda, E. Kinoshita-Kikuta, and T. Koike, J. Sep. Sci., 2005, 28, 155-162.
  2. "Enrichment of phosphorylated proteins from cell lysate using a novel phosphate-affinity chromatography at physiological pH", E. Kinoshita-Kikuta, E. Kinoshita, A. Yamada, M. Endo, and T. Koike, Proteomics, 2006, 6, 5088-5095.
  3. "りん酸基親和性クロマトグラフィーを用いた細胞内のりん酸化タンパク質の網羅的精製", 木下英司, 木下恵美子, 小池透,
    バイオテクノロジージャーナル, 2007, 7, 217-220.
  4. "Phos-tag beads as an immunoblotting enhancer for selective detection of phosphoproteins in cell lysates", E. Kinoshita-Kikuta, E. Kinoshita, and T. Koike, Analytical Biochemistry, 2009, 389, 83-85.
  5. "細胞内りん酸化タンパク質を高精度に検出するためのPhos-tagビーズによるサンプル前処理法", 木下英司, 木下恵美子, 小池透, 2009, 9, 934-938.

 

 

 

掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
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