和光純薬工業株式会社試薬 [Laboratory Chemicals] 試験研究用試薬・抗体の製造販売および各種受託サービス
製品カタログ 試験研究用試薬・抗体 請求
試薬ホーム  >  製品情報  >  ライフサイエンス  >  遺伝子  >  Thermostable β-Agarase

アガロースゲルからの核酸抽出試薬
Thermostable β-Agarase

Thermostable β-Agaraseは、(独)海洋研究開発機構が深海底泥から発見した耐熱性微生物由来のアガラーゼであり、極めて耐熱性に優れています。アガラーゼは、融解させた(ゾル化させた)アガロースをneoagaro-oligosaccharidesに分解する酵素で、分解後のアガロース溶液は再びゲル化しなくなります。
本品は、耐熱性に優れているため、簡便・短時間に操作でき、大きなDNAも比較的傷つけることなく回収することができます。


【使用方法】
使用方法


特長

  • 簡便&スピーディーな操作 (最短10分間での反応が可能)
  • ゲル分解液をそのままクローニングや制限酵素反応に使用可能
  • 大きなDNA断片もせん断の影響が少なく回収可能
  • 至適温度が50℃〜60℃の為、スタンダードタイプのアガロースにも使用可能
  • 回収のロスが少ない

製品情報

活性 1 unit/ μl
形状 50 mM NaCl
20 mM Tris-HCl (pH7.5)
保存条件 冷蔵 (2〜8℃)

【単位の定義】
1 unitは、60℃で 1分間当たり1 μmolの D-ガラクトースに相当する量の還元糖をアガロースゲルから生成する酵素活性とする。



マニュアル

製品マニュアル



使用例

使用例1

【アガロースゲルブロックから回収した DNAのクローニング】

 電気泳動で分離した500 bpのDNA断片 (PCR産物)をゲルブロック (150 mg)として低分子量用アガロースゲルから切り出し、Thermostable β-Agaraseで処理した。50 ngのベクター (3 kbp)に9 μlのゲル分解液を加えてライゲーション反応を行い、コンピテントセルを形質転換した。(対照として、ゲル分解液をアルコール沈殿・精製してから同様に、形質転換を行った。)
⇒結果:未精製でもクローニング効率に影響しない!




使用例2


【分子量の大きい DNA断片のアガロースゲルからの回収】

電気泳動で分離したT4 GT7 (166 kbp)、λ-DNA (48.5 kbp)、pUC (2.69 kbp)をゲルブロックとして低融点タイプアガロースゲルから切り出し、Thermostable β-Agaraseと他社製品 (スピンカラム)を用いて処理した。得られたDNA溶液の1/3量を、高強度タイプアガロースゲルを使用し電気泳動で分離した。
⇒結果:大きなDNA断片もきれいに取れる!




Agarose 21

【アガロースゲルブロックから回収した DNAの転写反応】

T7 promoter配列を有する DNA溶液 10 μl (250 ng/ μl)を 1% Agarose XP/ 1×TAEで電気泳動後、
目的のDNA断片をゲルブロック (48 mg)として切り出し、Thermostable β-Agaraseで処理した。
(ゲル融解:70℃、10分間→酵素 2 units添加→溶解反応:60℃、10分間)
得られたDNA溶液の 1/10量を鋳型DNAとして転写反応 (20 μl)を行い、
RNAの合成量を比較した (ニッポンジーン社製品 「CUGA® 7 in vitro Transcription kit」を使用)。
⇒結果:Tgermostable β-Agaraseを用いて回収した DNA溶液は、そのまま転写反応に使用することができる!




Lane 1:Thermostable β-Agaraseで回収した DNA断片を鋳型とし転写された RNA (10 μl = 転写産物の 1/2量)
Lane 2:T7 promoter配列を有する DNAを鋳型として転写された RNA (10 μl = 転写産物の 1/2量)



備考

 本酵素は、独立行政法人海洋研究開発機構、極限環境生物圏研究センターにおける研究により、有人潜水調査船「しんかい6500」を用いて深海から採取された耐熱性微生物に由来しています。詳しくは、シーエムシー出版『酵素開発・利用の最新技術』 第5章 深海微生物からの有用酵素の探索 p41-52をご参照下さい。



価格表

コードNo. 品 名 容 量 希望納入価格(円)
311-07121 Thermostable β-Agarase 300 units 18,000
317-07123 30 units 5,600

 

掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。最新価格は「製品検索」からコードNo.で検索してご確認ください。

試薬ホーム  >  製品情報  >  ライフサイエンス  >  遺伝子  >  Thermostable β-Agarase

和光純薬工業株式会社

本社〒540-8605大阪市中央区道修町三丁目1番2号       TEL 06-6203-3741(代表)
東京本店〒103-0023東京都中央区日本橋本町二丁目4番1号 TEL 03-3270-8571(代表)
●九州営業所 092-622-1005(代) ●中国営業所 082-285-6381(代) ●東海営業所 052-772-0788(代)
●藤沢営業所 0466-29-0351(代) ●筑波営業所 0298-58-2278(代) ●東北営業所 022-222-3072(代)
●北海道営業所 011-271-0285(代)
E-mail: labchem-tec@wako-chem.co.jp URL: http://www.wako-chem.co.jp
フリーダイヤル: 0120-052-099 フリーファックス: 0120-052-806